1. Стерилізація насиченою парою під тиском
2. Стерилізація текучою парою
Стерилізація парою під тиском – найефективніший метод в мікробіологічній практиці спосіб стерилізації, тому що з його допомогою швидко і надійно досягається стерилізація. Цей спосіб заснований на тому, що пара, що утворюється при кип’ятінні води, не виходить назовні, а накопичується в замкнутому просторі і підвищує тиск. Відповідно з підвищенням тиску збільшується температура кип’ятіння води:
Тиск температура
(атмосфери) °с
Стерилізація парою під тиском проводиться в автоклаві (стерилізаторі), зазвичай стерилізують до 1 надлишкової атмосфери, що відповідає температурі 119-120°с. Таким способом протягом 15-20 хвилин стерилізують: 1) заразні матеріали і заражену посуд; 2) прилади з гумовими деталями; 3) поживні середовища, не містять нативного білка і вуглеводів. Деякі поживні середовища (цукру) стерилізують при 0,5-0,7 ат., що відповідає 112-115°с.
Для контролю стерилізації серед стерилізованого матеріалу поміщають ампули з хімічними речовинами, що плавляться при певній температурі, змішані з барвником. При досягненні в камері певної температури порошок плавиться, утворюючи сплав, пофарбований в колір доданого барвника.
Таблиця 10. Показники температури плавлення порошків-індикаторів
Температура плавлення, с°
Назва хімічної речовини-індикатора
Температура плавлення, с°
Бензонафтол
Резорцин чистий
Антипірин
Бензойна кислота
Сірчаний колір
Примітка: на 100 г порошку-індикатора додають 0,01 г сафраніну, 0,005 г фуксину або метиленової сині.
Стерилізація текучою парою. текучою парою стерилізують при температурі 100°с. Для цієї мети існує текучепаровой апарат-апарат коха. Можна стерилізувати текучою парою і в автоклаві з відкритим краном. Стерилізацію проводять протягом 30-40 хвилин з моменту виділення пари. Одноразова стерилізація текучою парою не забезпечує повного обеспложіванія, тому що при температурі 100°с гинуть тільки вегетативні форми мікробів, суперечки зберігають життєздатність. Повне знеположення досягається лише при повторних стерилізаціях. Тому цей метод стерилізації називається дробової стерилізацією. Суть цього методу полягає в тому, що після першої стерилізації матеріал залишають при кімнатній температурі, даючи решті спорах прорости в вегетативні форми, на наступний день стерилізацію при 100°с повторюють. Що залишилися в меншому числі спорам знову дають прорости, залишаючи при кімнатній температурі, і через добу знову стерилізують при 100°c. Після третьої стерилізації при 100°с матеріал повністю звільнений від бактерій і суперечка.
Таким чином, стерилізація текучою парою проводиться в апараті коха або автоклаві при 100 °с 3 дні поспіль по 30 хвилин. Текучою парою стерилізують такі матеріали, які псуються або розкладаються при стерилізації парою під тиском (молоко, желатин, середовища з вуглеводами).
Тиндализация-метод дробової стерилізації, запропонований тиндалем для речовин, що не переносять температуру 100°с (сироватка крові, вітаміни). Матеріал піддають нагріванню протягом 5-6 днів поспіль при 56-58°с по 1 годині щодня. Тіндалізацію проводять на водяній бані з терморегуляторами.
Стерилізація інфрачервоними променями. цей метод стерилізації заснований на здатності інфрачервоних променів, при поглинанні речовиною, нагрівати цю речовину. Інфрачервоні промені не володіють специфічною дією на мікроорганізми, останні гинуть не від променів, а від високої температури. Цей метод використовують для стерилізації ряду хірургічних інструментів. Для цього випускають спеціальні інфрачервоні печі з глибоким вакуумом.
Стерилізація ультрафіолетовими променями. цей вид стерилізації проводиться за допомогою будь-якого джерела ультрафіолетових променів, найчастіше використовують бактерицидні лампи. Ці лампи являють собою ртутні газорозрядні світильники з фіолетового скла. Ультрафіолетові промені надають на мікроби бактерицидну дію. Цей метод стерилізації застосовують для знезараження повітря і поверхонь різних приміщень в клініках і лабораторіях, предметів і обладнання, води і харчових продуктів.
Механічна стерилізація-фільтрування. цей метод широко використовується в мікробіологічній практиці як для стерилізації рідин: лікувальних сироваток, токсинів, анатоксинів, поживних середовищ і лікарських препаратів, так і повітря.
Апарати, службовці для відділення зважених частинок від рідкого середовища, називаються бактеріальними фільтрами. Бактеріальні фільтри бувають порцелянові або керамічні, в яких фільтрування здійснюється через спеціально оброблений шар каоліну — свічки шамберлана, бейкфельда; скляні, в яких фільтруючою поверхнею є пластини з дрібнопористого скла; азбестові — з фільтруючою пластиною з клітковини — фільтр зейтца; мембранні або колоїдні, фільтруючі пластини, які виготовлені з нітроклітинки і ацетилцелюлози.
При паровому методі стерилізації стерилізуючим засобом є водяний насичений пар під надлишковим тиском, стерилізацію здійснюють в парових стерилізаторах (автоклавах). Використовують два режими роботи парового стерилізатора:
1-й режим-2,0 атм (кгс/см 2), 132 °с, 20 хвилин.
Рекомендується для виробів з корозійностійких металів (загальні хірургічні та спеціальні інструменти), скла, виробів з текстильних матеріалів (хірургічне білизна, перев’язувальний і шовний матеріал), гум, лігатурного шовного матеріалу.
2-й режим-1,1 атм (кгс/см 2), 120 °с, 45 хвилин.
Стерилізаційна коробка з фільтром або без фільтра;
Подвійна м’яка упаковка з бязі;
Пергамент;
Папір мішковий не просочений;
Папір крепований;
Стерилізаційні пакувальні матеріали фірми «зм» (сша).
Примітки:
1. Термін збереження стерильності виробів, простерилізованих в герметичній упаковці в пергаменті, папері мішкової просоченої, папері мішкової влагопрочной, папері пакувальної високоміцної, папері крепірованной. Стерилізаційній коробці з фільтром-20 діб, а в будь-якій негерметичній упаковці і стерилізаційній коробці без фільтра-3 доби;
2. Кратність використання пергаменту, паперу мішкової непропитанной, паперу мішкової влагопрочной і паперу крепірованной — до 2 — х разів, паперу пакувальної високоміцної (крафт)-до 3-х разів (з урахуванням їх цілісності).
Повітряний метод стерилізації
При повітряному методі стерилізації стерилізуючим засобом є сухе гаряче повітря. Стерилізацію здійснюють в повітряних стерилізаторах.
Використовують два режими роботи повітряного стерилізатора:
1-й режим – температура 160°с-150 хвилин;
2-й режим –температура180°с – 60 хвилин;
Видом пакувального матеріалу при обох режимах є:
Папір мішечна вологостійкий;
Папір пакувальна високоміцна;
Папір крепований;
Стерилізаційні пакувальні матеріали фірми «зм» (сша);
Або без упаковки (в відкритих лотках).
Повітряним методом стерилізують хірургічні, гінекологічні, стоматологічні інструменти, деталі приладів і апаратів, в тому числі виготовлені з корозійнонестійких металів, шприци з позначкою 200°с, ін’єкційні голки, вироби з силіконової гуми.
Перед стерилізацією повітряним методом вироби після передстерилізаційного очищення обов’язково висушують в сушильній шафі при температурі 85°с до зникнення видимої вологи.
Вироби стерилізують загорнутими в стерилізаційні пакувальні матеріали. Шприци стерилізують в розібраному вигляді.
Під час стерилізації металевих інструментів без упаковки їх розташовують так, щоб вони не торкалися один одного.
Примітки:
1. Термін збереження стерильності виробів, простерилізованих герметично упакованих в папір мішковий влагопрочную, папір пакувальний високоміцний, папір крепірованную — 20 діб. Кратність використання паперу мішкової влагопрочной, паперу крепірованной — до 2-х разів, паперу пакувальної високоміцної-до 3-х разів (з урахуванням їх цілісності).
2. Вироби, простерилізовані без упаковки, поміщають на» стерильний стіл » і використовують протягом однієї робочої зміни.
Стерилізація розчинами хімічних засобів
Стерилізація виробів розчинами хімічних засобів є допоміжним методом, оскільки не дозволяєПростерилізувати їх в упаковці, а після закінчення стерилізації необхідно промити вироби стерильною рідиною (питна вода, 0,9% розчин натрію хлориду), що при порушенні правил асептики може призвести до вторинного обсіменіння (контамінації) простерилізованих виробів мікроорганізмами.
Даний метод слід застосовувати для стерилізації виробів, в конструкцію яких входять термолабільні матеріали, тобто коли особливості матеріалів виробів не дозволяють використовувати інші рекомендовані методи стерилізації (фізичні). Конструкція виробу повинна дозволяти стерилізувати його розчинами хімічних засобів. При цьому необхідний хороший доступ стерилізуючого засобу і промивної рідини до всіх стерилізованих поверхонь вироби.
Для стерилізації виробів розчинами хімічних засобів використовують засоби, дозволені до застосування для цієї мети по режимам згідно з інструктивно-методичним документам, затвердженим в установленому порядку моз республіки білорусь. Для стерилізації не дозволяється застосовувати засоби, що не володіють спороцидну дію.
При стерилізації розчинами хімічних засобів використовують стерильні ємності зі скла, металів, термостійких пластмас, що витримують стерилізацію паровим методом, або покриті емаллю (емаль без пошкоджень).
Температура розчинів, за винятком спеціальних режимів застосування перекису водню і для альдегідовмісних коштів повинна становити не менше 20°с, а для решти коштів не менше 18°с.
Стерилізацію проводять при повному зануренні виробу в розчин, вільно їх розкладаючи. При великій довжині вироби його укладають по спіралі. Роз’ємні вироби стерилізують в розібраному вигляді. Канали і порожнини заповнюють розчином. Товщина розчину над виробом повинна бути не менше 1 см.
Щоб уникнути розведення робочих розчинів, використовуваних для стерилізації, занурюються в них вироби повинні бути сухими.
Після стерилізації всі маніпуляції проводять, строго дотримуючись правил асептики. Вироби витягують з розчину за допомогою стерильних пінцетів (корнцангів), видаляють розчин з каналів і порожнин, а потім промивають в стерильною водою, налитої в стерильні ємності, згідно з рекомендаціями методичного документа щодо застосування конкретного засобу. При кожному перенесенні з однієї ємності в іншу звільнення каналів і порожнин і їх заповнення свіжою рідиною здійснюють за допомогою стерильного шприца, піпетки або іншого пристосування.
Промиті стерильні вироби після видалення залишків рідини з каналів і порожнин використовують відразу за призначенням або поміщають (за допомогою стерильних пінцетів, корнцангів) на зберігання в стерильну стерилізаційну коробку, викладену стерильним простирадлом, на термін не більше 3 діб.
Стерилізація газовим методом
Для газового методу стерилізації використовують суміш об (суміш окису етилену і бромистого метилу у ваговому співвідношенні 1:2,5 відповідно), окис етилену, пари розчину формальдегіду в етиловому спирті.
Контроль стерилізації
Парові, повітряні та газові стерилізатори, що використовуються для стерилізації виробів медичного призначення, підлягають контролю. Контроль дозволяє оперативно виявити невідповідність режимів стерилізації, викликане технічними несправностями апаратів і порушенням технології проведення стерилізації.
Контроль стерилізації передбачає перевірку параметрів режимів стерилізації та оцінку її ефективності. Контроль режимів стерилізації проводять фізичним (за допомогою контрольно-вимірювальних приладів: термометрів, мановакуумметрів та ін.), хімічним (з використанням хімічних індикаторів) і бактеріологічним (з використанням спорових форм тест-культур) методами.
Організація та порядок проведення контролю за стерилізацією виробів медичного призначення здійснюється згідно з методичними вказівками му№ 90-9908 «контроль якості стерилізації виробів медичного призначення».
Самоконтроль роботи стерилізаторів проводить персонал лпу фізичним і хімічним методами — при кожному завантаженні стерилізаторів, бактеріологічним — щомісяця.
Перевірку температурного режиму здійснюють за допомогою максимальних термометрів, які поміщають в контрольні точки стерилізаторів.
Для контролю температури використовують також хімічні індикатори різних типів: індикатори типу іс (зовнішні, внутрішні, мультипараметричні, інтегратори) і хімічні тести, які поміщають в контрольні точки.
Індикатори типу іс являють собою смужку паперу з нанесеним на неї індикаторним шаром і призначені для оперативного візуального контролю сукупності параметрів (температура, час) режимів роботи парових і повітряних стерилізаторів.
Хімічні тести являють собою скляні трубки, запаяні з обох кінців і наповнені бензойною кислотою, яка при температурі 120-122°с змінює свій агрегатний стан, або сечовиною, яка змінює свій агрегатний стан при температурі 130-134°с. Ці тести використовують для автоклавів. Для сухожарових шаф трубки заповнюються тіомочевиною, яка змінює свій агрегатний стан при температурі 172-174°с. Хімічні тести призначені для контролю досягнення заданої температури по зміні агрегатного стану і/або кольору хімічних сполук, що спостерігається після закінчення стерилізації.
Медичний персонал, що використовує засоби фізичного та хімічного контролю, реєструє результати контролю в журналі за формою № 257/у.
Література
1. Юпатов г.і., доценко е. А., ольшаннікова в. В. Загальний догляд за хворими (терапія). Навчальний посібник.- вітебськ: вгму.2007.- 191 с.
2. Яромич і. В.сестринська справа і маніпуляційна техніка: підручник.- мінськ: вишейшая школа, 2014.-527 с.: іл.
Склали ст. Преп. І. В. Арбатська, ас-совм. В.в. Ольшаннікова
Лабораторний посуд перед стерилізацією необхідно ретельно вимити, висушити, загорнути в папір. Чашки загортають в папір по одній або кілька штук. У верхні кінці піпеток вставляють ватні тампони, що попереджають засмоктування матеріалу градуйовані піпетки загортають в довгі смужки паперу шириною 5 см. На папері відзначають обсяг загорнутої піпетки. У пеналах піпетки стерилізують без додаткового загортання в папір.
Гострі кінці пастерівських піпеток запаюють в полум’ї пальника і загортають в папір по 3-5 штук.
Флакони, колби, пробірки закривають ватно-марлевими пробками. Пробка повинна входити в шийку судини на 2/3 довжини, не дуже туго, але і не вільно. Поверх пробок на посудину надягають паперовий ковпачок. Пробірки пов’язують по 5-50 штук і обгортають поверх папером.
Режим роботи сухожарової шафи
Стерилізацію сухим жаром здійснюють в сухожарових шафах (піч пастера). Сухим жаром стерилізують лабораторний посуд. Її нещільно завантажують в піч, щоб був рівномірний прогрів матеріалу. Двері шафи щільно закривають, включають електронагрівальний прилад і доводять температуру до 160-165 0 с і стерилізують 1 годину. Після закінчення стерилізації вимикають обігрів, але дверцята шафи не відкривають, поки піч не охолоне (інакше холодне повітря викличе утворення тріщин на посуді). Режим стерилізації: 160°с — 60 хв, 180°с — 15 хв, 200° с — 5 хв. Рідини, поживні середовища, предмети з гуми і синтетичних матеріалів не можна стерилізувати сухим жаром.
Стерилізації парою під тиском піддають перев’язувальний матеріал, операційну білизну, хірургічні інструменти, поживні середовища, лабораторний посуд, інфікований матеріал, ін’єкційні розчини. Матеріал поміщають в ємності (бікси). На дно бикса поміщають прокладки з тканини, вбирають вологу після стерилізації. Стерильність матеріалу зберігається 3 доби. Інфікований матеріал в чашках і пробірках стерилізують в металевих бачках з кришкою.
Стерилізацію парою під тиском виробляють в автоклаві. При одноразовій обробці гинуть як вегетативні, так і спорові форми бактерій. Паром під тиском стерилізують поживні середовища, крім середовищ, що містять нативні білки, рідини, прилади, що мають гумові частини. Прості середовища (мпа, мпб) стерилізують 20 хв при 120°с (1 атм). Середовища, що містять нативні білки і вуглеводи, при цій температурі не можна стерилізувати, тому що це легко змінюються від нагрівання речовини. Середовища з вуглеводами стерилізують дрібно при 100 0 с або в автоклаві при 112 0 с (5 атм.) 10-15 хв. Різні рідини, прилади, що мають гумові шланги, пробки, бактеріальні свічки і фільтри стерилізують при 120 0 с (1 атм.
Інфікований матеріал (в пробірках, чашках) поміщають в спеціальні металеві відра або баки з отворами для проникнення пари і стерилізують при 126 0 с (1,5 атм.) вПротягом 1 години. Також стерилізують інструменти після роботи зі споровими бактеріями.
Існує 2 режими стерилізації:
Текучою парою в автоклаві або в апараті коха при не загвинченій кришці і відкритому випускному клапані, коли антибактеріальну дію пари проявляється щодо вегетативних форм. Так стерилізують середовища з вітамінами і вуглеводами, сечовиною, молоком, картоплею і желатином. Для повного знеположення застосовують дробову стерилізацію (при 100 0 с) 20-30 хв 3 дні поспіль. Це вбиває і суперечки.
Стерилізація парою під тиском — найбільш ефективний метод знеположення. перев’язувальний матеріал, білизну стерилізують при 1 атм. 15-20 хв, інфікований матеріал при 1,5-2 атм протягом 20-25 хв.
Даний спосіб стерилізації поживних середовищ є найбільш надійним і найчастіше застосовуваним. Він заснований на нагріванні матеріалу насиченою водяною парою при тиску вище атмосферного. Відомо, що температура пара зростає при підвищенні його тиску (табл. 4.1).
Спільна дія високої температури і пари забезпечує особливу ефективність цього процесу. При цьому гинуть і вегетативні клітини, і спори мікроорганізмів. Встановлено, що спори більшості мікроорганізмів не витримують і 5-хвилинну експозицію в насиченій парі при 121 °с.лише спори деяких ґрунтових бактерій гинуть при 1 ати тільки через 30 хв.
Таблиця 4.1 температура насиченої пари при різних тисках
Ати* — надлишковий атмосферний тиск
Рис. 4.1. Схема автоклава:
1 — стерилізаційна камера; 2 — кран для виходу повітря; 3 — манометр; 4 — запобіжний клапан; 5 — водопаровая камера; 6 — воронка для заповнення автоклава водою; 7 — водомерная трубка; 8 — отвори для надходження пари в стерили-зационную камеру; 9 — захисний кожух; 10 — кришка автоклава; 11 — підставка для розміщення стерілізуемих предметів
Стерилізацію парою під тиском проводять у спеціальних герметично закриваються товстостінних апаратах — автоклавах. Автоклави різноманітні за формою, розмірами, робочим тиском, конструкції та іншими показниками. Вони можуть бути з ручним керуванням, напівавтоматичні і автоматичні, але, оскільки всі автоклави призначені для виконання однієї і тієї ж завдання — стерилізації, основний принцип їх пристрою один і той же.
На рис. 4.1 показана схема вертикального автоклава з ручним у правлінням. Автоклав являє собою металевий двостінний резервуар, здатний витримати високий тиск. Його внутрішня частина є стерилізаційною камерою (7). У неї поміщають стерилізується матеріал. Стерилізаційна камера забезпечена краном (2) для виходу повітря, манометром (3) для визначення тиску пари і запобіжним клапаном (4) для виходу пари при підвищенні тиску понад необхідне і для запобігання розриву автоклава. Простір між стінками, зване водопаровой камерою (5), заповнюється через воронку (6) водою (краще дистильованої, щоб не утворювалася накип) до певного рівня, який відзначений на спеціальній водомірної трубці автоклава (7). Вище цього рівня воду наливати не слід, так як при бурхливому кипінні вода може потрапити в трубку, що веде до манометру і спотворити його показання. У верхній частині внутрішньої стінки водопаровой камери є отвори (8), через які пара надходить в стерилізаційну камеру. Паровий котел зверху покритий захисним кожухом (9). Він оберігає котел від механічних пошкоджень, а працюючого близько автоклава — від опіків. Для створення герметичності автоклав щільно закривають масивною кришкою (10) з гумовою прокладкою. Стерилізовані предмети поміщають на спеціальну підставку (11).
Процес автоклавування.
Окремі операції процесу стерилізації в автоклавах різних типів можуть бути дещо різними. Відповідно дещо різниться і техніка роботи з ними, проте загальний принцип проведення стерилізації в різних автоклавах однаковий.
Перед роботою оглядають автоклав і контрольно-вимірювальну апаратуру. При наявності будь-якої несправності (зміщення стрілки манометра з нуля, тріщина на водомірній трубці та ін.) працювати з приладом не можна. Після огляду автоклава в водопаровую камеру наливають воду до верхньої позначки на водомірній трубці. У стерилізаційну камеру на спеціальну підставку з дерева поміщають стерилізується матеріал. Предмети слід розміщувати не дуже щільно, так як пар повинен вільно проходити між ними, інакше вони не нагріються до потрібної температури і можуть залишитися нестерильними. Завантаживши стерилізаційну камеру, встановлюють і щільно загвинчують кришку (двері) автоклава. Потім відкривають кран, що з’єднує стерилізаційну камеру з зовнішнім повітрям, і включають нагрів.
Після початку пароутворення видаляють повітря з стерилізаційної камери. Це необхідна умова стерилізації, так як при одному і тому ж тиску температура чистої пари вище температури суміші пари і повітря. Якщо в автоклаві залишиться повітря, матеріал може не простерилізуватися. Найбільш простий і дуже поширений спосіб звільнення автоклава від повітря — витіснення повітря парою. Пар і конденсат відводять або в посудину з водою, або в спеціальний пристрій, поєднане з каналізацією. У першому випадку на кран (2) надягають гумовий шланг, який опускають у воду. Початком продування вважається поява стійкої безперервної струменя чистого пара. Поки в автоклаві ще є повітря, суміш повітря і пари, проходячи через воду, видає сильний тріск. Чистий пар виходить з рівномірним шиплячим звуком. Його пропускають протягом 10 хв.в цілому вся операція з моменту появи пари з повітрям повинна займати не більше 15 — 20 хв, інакше в автоклаві залишиться мало води і він може зіпсуватися. Щоб зменшити витрату пари (води), кран відкривають в повному обсязі. Ступінь відкривання крана встановлюють на практиці при експлуатації автоклава. У найбільш досконалих автоклавах повітря з стерилізаційної камери видаляють за допомогою вакуумного насоса.
Коли повітря витіснене, закривають паровідвідний кран, і тиск пари доводять до показання, відповідного режиму стерилізації. Режим автоклавування часто висловлюють в одиницях надлишкового тиску, вказуючи при цьому тривалість його підтримки, наприклад стерилізація при 1 ати протягом 20 хв.на манометрі автоклава позначається саме той надлишковий тиск, який створюється в автоклаві понад нормальний. Нерідко режим автоклавування характеризується температурою і часом. Як тільки стрілка манометра дійде до покажчика певного додаткового тиску і, отже, температура пари досягне відповідного значення, цей рівень тиску пари підтримують протягом необхідного часу шляхом ручного або автоматичного регулювання подачі пари. В автоматичних автоклавах подачу пари регулюють електроконтактним манометром.
Після закінчення часу стерилізації вимикають нагрів автоклава. Тиск в автоклаві поступово падає і порівнюється з атмосферним. Лише після цього відкривають кран, що виводить пар. Передчасне відкривання крана неприпустимо, так як перегріті середовища при різкому зниженні тиску відразу ж бурхливо закипають, змочують і навіть іноді виштовхують ватяні пробки, що порушує стерильність матеріалу. Коли пар вийде, відкривають кришку (двері) автоклава, дотримуючись при цьому обережність, щоб уникнути опіку парою обличчя і рук. Видалення пари з стерилізаційної камери автоклавів, оснащених вакуумним насосом, здійснюють за допомогою насоса. Одночасно відбувається підсушування стерильного матеріалу.
Оскільки автоклав працює при високих тисках і температурах, неправильне поводження з ним може бути причиною нещасних випадків. Установка автоклава і робота з ним проводяться при точному і строгому виконанні правил, зазначених в інструкції, що додається до автоклава. До роботи допускаються тільки підготовлені особи, які мають спеціальний дозвіл.
При необхідності проконтролювати температуру в автоклаві користуються різними речовинами, що плавляться при певній температурі. Ці речовини попередньо змішують з нейтральними барвниками і поміщають в автоклав до початку стерилізації. В якості індикаторів температури використовують фенантрен (температура плавлення 98-100°с), бензаурин (115°с), сірку (119 °с), бензойну кислоту (121 — 122 °с), сечовину (132°с), глюкозу (146°с), тіомочевину (180°с), аскорбінову кислоту (187 — 192 °с). На 100 г цих речовин беруть 0,01 г барвника (фуксин, метиленовий синій), ретельно змішують, розсипають в скляні трубочки з однаковим діаметром і товщиною стінок, запаюють і в вертикальному положенні розкладають між стерилізується матеріалом в автоклаві. Після досягнення в посудині відповідної температури ці речовиниРозплавляються і фарбуються в колір доданого в них барвника.
Підготовка середовищ до стерилізації.
При автоклавуванні 3 — 5% рідини втрачається в результаті випаровування, тому рекомендується в готуються середовища додавати понад обсяг приблизно 5% дистильованої води. Тоді після стерилізації середовище (розчин) матиме необхідну концентрацію.
Середовища зазвичай стерилізують в пробірках, колбах, бутлях. Ємності заповнюють середовищем не більше ніж на половину їх висоти, щоб запобігти змочування пробок. Судини з середовищами закривають ватяними пробками. Вони оберігають середовище від зараження мікроорганізмами, що знаходяться в навколишньому повітрі.
Пробки повинні бути досить щільними, щоб виконувати цю функцію, але з досить рівномірним розподілом волокон вати, так як через них відбувається газообмін культур з навколишнім середовищем. Занадто щільні пробки ускладнюють постачання культур повітрям.
Для приготування пробки плоский шматок вати, взятий уздовж волокна, скачують валиком. Щоб надати пробці міцність, її прокочують між долонею і чистим склом, що лежить на столі. Довжина пробки для звичайної пробірки приблизно 4 см.пробка повинна входити в пробірку на 1,5 — 2,0 см (рис. 4.2). Для збереження форми пробку виймають з горлечка, злегка обертаючи. Зручно обернути пробку чистою марлевою серветкою.
Перед стерилізацією пробки можна прикрити паперовими ковпачками. Не можна обгортати пробки судин, які будуть стерилізуватися в автоклаві, целофаном, фольгою або іншими матеріалами, що не пропускають пар, так як пара повинна проникати через пробку в посудину, інакше середовища не нагріються до потрібної температури і не простерилізуються. При використанні скляних, гумових, кіркових та інших пробок їх загортають в подвійний шар обгорткового паперу і стерилізують прив’язаними до склянки, закритою ватною пробкою. Пробки в посудині змінюють стерильно близько полум’я пальника.
Перевагою методу є швидкий і рівномірний прогрів всього обсягу стерилізується камери, так як щільність і теплопровідність пари дорівнює таким показникам для води. Тому тривалість і температура стерилізації водяною парою нижче, ніж нагрітим повітрям
Таблиця 3.8, б. Повітряний метод стерилізації (сухе гаряче повітря)
Парова стерилізація насиченою парою проводиться в 2 режимах:
При надмірному тиску: 0,11 + 0,02 мпа (1,11 + 0,2 кгс/см 2) — температура (120 + 2) грапд.со;
При надмірному тиску: 0,2 + 0,02 мпа (2,2 + 0,2 кгс/см 2) — температура (132 + 2) град.с.
Стерилізацію парою при температурі (132 + 2) град.с рекомендують для розчинів термостабільних лікарських речовин (табл. 3.10).
Таблиця 3.9. Час стерилізаційної витримки в залежності від об’єму розчину
Таблиця зло. Паровий метод (водяний насичений пар під тиском)
Контроль температурного режиму парової стерилізації здійснюють максимальним термометром зі шкалою на 210 град.з або термопарами. В якості хімічного термотесту використовують суміш бензойної кислоти з фуксином (10:1), температура плавлення — 121 град.с.
Стерилізацію парою під тиском проводять в парових стерилізаторах різної конструкції (рис. 3.22, 3.23). За формою стерилізатори парою під тиском діляться на циліндричні (кругові, буква к в позначенні) і прямокутні (буква п). Циліндричні можуть розташовуватися горизонтально і вертикально (букви гів відповідно). Приклад позначення стерилізаторів:
Вк-вертикальний круговий електричний;
Гп — горизонтальний прямокутний електричний односторонній;
Гпд — горизонтальний прямокутний електричний двосторонній.
Цифри позначають діаметр стерилізаційної камери. Стерилізатор складається з 3 циліндрів. Перший (зовнішній) циліндр називається кожухом. Він оберігає паровий котел стерилізатора від можливих механічних пошкоджень, а обслуговуючий персонал — від опіків.
Рис. 3.23. Стерилізатор паровий вк-75
Рис. 3.22. Стерилізатор паровий дп-400
Другий (середній) циліндр-головна частина стерилізатора, звана водопаровой камерою. Вона виготовляється з високоякісної сталі і призначена для отримання пари з води.
Третій (внутрішній) циліндр називається стерилізаційною камерою. Її призначення-вміщати стерилізується матеріал, захищаючи його від води. У верхній частині стерилізаційної камери розташовані отвори для проходження в неї пари. Крім того, вони служать сепаратором, відокремлюючи пар від крапель води, щоб стерилізується матеріал не зволожувався (пар захоплює частинки води). Кришка з гумовою прокладкою і центральним затвором служить для того, щоб наглухо закривати водопаровую камеру. Через цю ж кришку завантажують стерилізується матеріал. Пар в стерилізаційну камеру надходить з казанка (або з водопарової камери), що має всередині електронагрівальний елемент. Водопарова камера заповнюється водою очищеною через воронку. За наповненням стежать по водомірному склу.
Стерилізатори під тиском забезпечені електроконтактним манометром, мановакуумметром, водоструминним ежектором, насо-сом і запобіжним клапаном. Електроконтактний манометр забезпечує автоматичну підтримку заданого тиску.
Мановакуумметр служить для контролю тиску в стерилізаційній камері. За допомогою водоструминного ежектора досягаються швидкий відсмоктування пари після кожної стерилізації, створення вакууму в стерилізаційній камері і сушка стерилізованих матеріалів, що особливо важливо при стерилізації паперу, вати та ін. Запобіжний клапан служить для запобігання стерилізу — тора від надмірного підвищення тиску пари в ньому.
Найбільш зручні настільні парові стерилізатори (мал. 3.24), в яких автоматично підтримуються задані тиск і температура, а також передбачена можливість просушування вспо — могательного матеріалу після стерилізації (вата, фільтрувальний папір, марля і т.п.). Для видалення повітря з камери, швидкого сушіння матеріалу після стерилізації є вбудований вакуум-насос.
Стерилізатор має рідкокристалічний дисплей з сенсорною клавіатурою, що дозволяє вибирати:
3 стерилізаційні програми для запакованого і відкритого інструментарію при 134 град.з;
Рис. 3.24. Напівавтоматичний стерилізатор паровий
2 стерилізаційних програми для запакованого і відкритого інструментарію при 121 град.з;
Програму з налаштовуваними параметрами;
Швидкий цикл (134 град.с-4 хв, загальний час-14 хв).
